TGF—β1对小鼠表皮细胞生长动力学影响的研究

目的探讨离体培养条件下TGF-β1对小鼠表皮细胞生长动力学的影响。方法分离培养c-57小鼠表皮细胞，以每孔5×10^4细胞接种于96孔板，培养72h后，（1）加入不同浓度的TGF—β1，观察其对表皮细胞生长的抑制作用；（2）加入不同浓度抑制剂SB431542，30min后加入10μg／mL TGF-β1，观察其对TGF—β1的拮抗作用。以XTT法测定细胞增殖曲线。以Brdu标记，用DAKO-Brdurd单克隆抗体共孵育，用荧光标记免抗鼠二抗显色，用PI衬染，流式细胞仪分析，计算不同细胞周期比率和细胞周期时间。结果TGF-β1可抑制小鼠表皮细胞的增殖，并有浓度依赖性，且作用时间越长，抑制作用越显著。SB431542能拮抗TGF-β1对表皮细胞的抑制作用，且当10-5mol／L时拮抗作用最强。流式细胞仪分析显示，用10μg，mLTGF-β1作用52h后，G0/G1期细胞百分率显著增加（从47％增加到78％），Brdu阳性百分率下降95％，Brdu阳性细胞的下降与S期细胞下降平行。结论培养条件下TGF-β1可以使小鼠表皮细胞生长停止于G0／G1期，具有抑制细胞增殖的作用。SB431542可以拮抗TGF-β1对小鼠表皮细胞生长的抑制作用。