谷氨酰胺酶1对卡介苗诱导的巨噬细胞自噬的调控作用

目的：探讨谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)在卡介苗(Bacille Calmette-Guérin,BCG)感染的巨噬细胞中对自噬的调控作用。方法：培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，利用小干扰RNA敲减巨噬细胞内GLS1的表达并结合BCG感染，采用免疫荧光染色、流式细胞术、ELISA和Western blot等技术检测自噬相关指标，阐明GLS1对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用，并初步探讨其机制。结果：(1)BCG感染巨噬细胞显著增加了LC3B和GLS1的蛋白表达量(P<0.01)，促进了谷氨酰胺分解；(2)敲减GLS1显著增加了巨噬细胞内谷氨酰胺的含量(P<0.05)，同时显著降低了巨噬细胞的自噬率以及自噬相关因子LC3B(P<0.01)、beclin-1(P<0.01)和ATG12(P<0.05)的蛋白表达量；(3)剥夺培养液中的谷氨酰胺处理细胞后，敲减GLS1对BCG感染的巨噬细胞中自噬相关因子LC3B、ATG5和ATG12的表达以及自噬流的发生无显著影响。结论：在BCG感染巨噬细胞RAW264.7过程中，敲减GLS1后可通...