| 人巨细胞病毒UL123基因外显子2,3诱饵质粒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 马琼山,文兰,陈利玉,罗敏华,邬国军.人巨细胞病毒UL123基因外显子2,3诱饵质粒的构建与鉴定[J].中国医师杂志,2006,8(10):1310-1312. |
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| 作者姓名： | 马琼山 文兰 陈利玉 罗敏华 邬国军 |
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| 作者单位： | 中南大学基础医学院医学微生物学系,湖南,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30470088) |
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| 摘 要： | 目的构建和鉴定人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因外显子2,3(ie1-exon2,3)的诱饵质粒,并评价其用于筛选胎儿脑文库的可行性。方法以重组质粒pTW IN1/ie1为模板扩增ie1-exon2,3,克隆入pBT质粒,转化E.coli XL1-B lue MRF'Kan,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,提取阳性重组质粒转化入细菌双杂交系统报告菌株,诱导表达重组融合蛋白,用SDS-PAGE和W estern B lot对表达产物进行鉴定,并进一步鉴定重组子自身激活作用。结果在细菌双杂交系统中成功构建了细菌双杂交诱饵质粒pBT/ie1-exon2,3,并在报告菌株中表达了重组融合蛋白rIE1-N85/λC1,且pBT/ie1-exon2,3无自身激活作用。结论成功构建了无自激活作用的诱饵质粒pBT/ie1-exon2,3,可用于筛选胎儿脑文库。
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| 关 键 词： | 巨细胞病毒 外显子 质粒 克隆 分子 |
| 收稿时间： | 2006-07-05 |
| 修稿时间： | 2006年7月5日 |
Cloning and expression of human cytomegalovirus UL123 gene exon 2, 3 in bacterial two-hybrid bait plasmid |
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| MA Qiong-shan,WEN Lan,CHEN Li-yu,LUO Ming-hua,WU Guo-jun.Cloning and expression of human cytomegalovirus UL123 gene exon 2, 3 in bacterial two-hybrid bait plasmid[J].Journal of Chinese Physician,2006,8(10):1310-1312. |
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| Authors: | MA Qiong-shan WEN Lan CHEN Li-yu LUO Ming-hua WU Guo-jun |
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| Keywords: | Cytomegalovirus Exons Plasmids Cloning molecular |
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