兔关节软骨细胞在藻酸盐串珠中培养维持其表型稳定的研究

目的：软骨细胞在单层培养时，多次传代后细胞表型发生改变。将兔关节软骨细胞在藻酸盐串珠中作立体培养，以保持其特有表型。方法：用酶消化法获取兔关节软骨细胞，分别在普通培养瓶中作贴壁的单层培养，并传代；或制成细胞/藻酸盐悬液，再进一步制成串珠，使细胞在具有三维立体结构的串珠中生长、繁殖。细胞涂片、石蜡切片，受尔新蓝染色，采用倒置微镜、透射电镜观察；以RT-PCR方法检测软骨细胞中Ⅱ型胶原及凝集聚糖mRNA的表达。结果：单层培养时有较高的细胞增殖率，5代以后渐失去软骨细胞特有的表型。立体培养时细胞分泌的基质大部分位于自身的周围，特有表型可长期保持稳定。3个月后藻酸盐串珠中的软骨细胞仍可测得Ⅱ型胶原和凝集聚糖的表达。结论：软骨细胞在藻酸盐串珠中培养有助于其合成、分泌基质，维持细胞特有表型的稳定。