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6A8α-甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强
引用本文:曲莉,向志光,史耕先,刘音,崔巍,杨海鹏,朱立平.6A8α-甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间的黏附性增强[J].中华微生物学和免疫学杂志,2004,24(6).
作者姓名:曲莉  向志光  史耕先  刘音  崔巍  杨海鹏  朱立平
作者单位:1. 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学系
2. 北京大学首钢医院检验科
基金项目:国家 973重大基础研究项目 ( 2 0 0 1CB5 10 0 0 4),国家自然科学基金项目 ( 3 0 170 868)
摘    要:目的 探讨 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制对人T淋巴母细胞Jurkat生物学行为的影响。方法 采用反义核酸技术抑制细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达。用PCR检测转导基因在基因组中的整合。用单抗 6A8作探针 ,Western印迹和免疫荧光染色流式细胞术检测细胞中 6A8α 甘露糖苷酶的表达状况。用ConA结合试验检测细胞蛋白质的糖基化改变。普通光学显微镜观察细胞的形态。用DNA芯片技术分析AS细胞和M细胞mRNA表达的差异。用RT PCR和免疫荧光染色流式细胞术验证基因芯片结果的可靠性。结果 制备了 6A8α 甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞 (AS)。与对照细胞 (野生型细胞W和转导空载体的细胞M)相比 ,AS细胞在培养中黏附成大团块。DNA芯片分析见与M细胞相比 ,AS细胞中有 19个基因的表达上调 ,2 0个基因的表达下调。上调的基因中有一些与细胞间黏附相关 ,如CD5 4、CD11a、CD2 4、CD82、整合素αX、整合素α7、整合素αE、IL 1R、IL 2Rγ和TNFSF9。RT PCR肯定了DNA芯片分析的可靠性。免疫荧光染色流式细胞术进一步肯定了CD5 4和CD11a在AS细胞表达的上调。结论  6A8α 甘露糖苷酶表达抑制使Jurkat细胞间黏附增强 ,CD5 4和CD11a等黏附分子表达的增高可能与此相关。

关 键 词:6A8α-甘露糖苷酶  糖基化  Jurkat细胞  黏附

Inhibition of 6A8α-mannosidase expression causes an enhancement of cell-cell adhesion among Jurkat cells
QU Li ,XIANG Zhi-guang,SHI Geng-xian,LIU Yin,CUI Wei,YANG Hai-peng,ZHU Li-ping.Inhibition of 6A8α-mannosidase expression causes an enhancement of cell-cell adhesion among Jurkat cells[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2004,24(6).
Authors:QU Li  XIANG Zhi-guang  SHI Geng-xian  LIU Yin  CUI Wei  YANG Hai-peng  ZHU Li-ping
Institution:QU Li *,XIANG Zhi-guang,SHI Geng-xian,LIU Yin,CUI Wei,YANG Hai-peng,ZHU Li-ping. *Department of Immunology,Institute of Basic Medical Science,Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College,Beijing 100005,China
Abstract:
Keywords:
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