| 摘 要： | 目的:建立以高效液相色谱法(HPLC)同时测定银翘散精简方中绿原酸、连翘苷、橙皮苷、牛蒡苷含量的方法,观察银翘散精简方提取物体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用。方法:采用Phenomsil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离;甲醇-0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 m L·min-1;检测波长275 nm。采用血凝试验方法,测定银翘散精简方提取物体外和鸡胚内抑制流感病毒效价,分析银翘散精简方提取物对病毒增殖的影响。结果:绿原酸在1.89~189 mg·L-1呈良好的线性关系(r=0.9986),连翘苷在0.93~22.32 mg·L-1呈良好的线性关系(r=0.9984),橙皮苷在3.04~30.4 mg·L-1呈良好的线性关系(r=0.9992),牛蒡苷分别在5.05~151.5 mg·L-1呈良好的线性关系(r=0.9983)。绿原酸的平均加样回收率为92.05%(n=6),RSD 0.81%,连翘苷的平均加样回收率为102.56%(n=6),RSD 1.15%,橙皮苷的平均加样回收率为96.97%(n=6),RSD 1.72%,牛蒡苷的平均加样回收率为94.88%(n=6),RSD 1.0%。银翘散精简方提取物可直接抑制甲型流感病毒FM1株的活性,作用时间从1 h可持续到24 h。银翘散精简方提取物对流感病毒感染鸡胚有一定的预防和治疗作用,且治疗作用优于阳性对照利巴韦林组(P0.05)。结论:该方法简便、准确,重复性好,可用于银翘散精简方的质量控制。银翘散精简方提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株。
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