人胃癌印制消减cDNA文库的构建及文库质量分析

目的：构建人胃癌抑制消cDNA文库，为大批量筛选、克隆胃癌特异性表达的基因奠定基础。方法：从胃癌和癌旁正常组织分离poly（A）^ RNA，经反转录后，利用抑制消减杂交（SSH）方法，通过两轮杂交和两次抑制PCR构建了两种组织间差异表达基因的cDNA消减文库，结果与结论：挑取800个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段，结果显示其中750个克隆有插入片段，片段大小范围为250－700bp。为进一步大批量筛选、克隆胃癌特异性表达的基因奠定了基础。