| 瑞替普酶融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及其复性 |
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| 引用本文： | 孙石静, 张新元, 孙雄华, 廖建民, 沈子龙. 瑞替普酶融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及其复性[J]. 中国药科大学学报, 2005, 36(4): 363-367. |
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| 作者姓名： | 孙石静 张新元 孙雄华 廖建民 沈子龙 |
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| 作者单位： | 1.中国药科大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 江苏省高技术研究发展计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:为优化瑞替普酶(reteplase,r-PA)在大肠杆菌中的高效融合表达的条件,并提高其复性率。方法:通过改变诱导时间和温度、诱导剂浓度、培养基pH值及氨苄青霉素(Amp)浓度等条件,利用SDS-PAGE分析以上条件的改变对表达产物产量的影响。运用金属螯合层析对融合蛋白进行纯化和复性。结果与结论:LB培养基pH值为6,Amp浓度为100μg/mL,乳糖浓度为5 mmol/L的条件下39℃诱导4 h可获得高效表达的r-PA融合蛋白,其表达量占全菌蛋白的70%,其产物主要以包涵体形式存在。融合蛋白运用金属螯合层析一步纯化复性,其复性率可达10%,比活为55.7 U/μL。
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| 关 键 词： | 瑞替普酶 融合蛋白 诱导表达 优化 复性 |
| 文章编号： | 1000-5048(2005)04-0363-05 |
| 修稿时间： | 2004-10-28 |
Optimization of Expression Conditions for Reteplase Fusion Protein in Escherichia coli and its Renaturation |
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| SUN Shi-Jing,ZHANG Xin-yuan,SUN Xiong-Hu,LIAO Jian-Min,SHEN Zi-Long. Optimization of Expression Conditions for Reteplase Fusion Protein in Escherichia coli and its Renaturation[J]. Journal of China Pharmaceutical University, 2005, 36(4): 363-367 |
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| Authors: | SUN Shi-Jing ZHANG Xin-yuan SUN Xiong-Hu LIAO Jian-Min SHEN Zi-Long |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Reteplase Fusion protein Induction expression Optimization Renaturation |
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