PeroxiredoxinⅡ小鼠卵巢中卵泡、GV卵、MII卵和植入前胚的表达和定位

目的观察PeroxiredoxinⅡ在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位，为探讨PeroxiredoxinⅡ在小鼠卵母细胞发育成熟和早期胚发育的作用提供依据。方法根据小鼠PeroxiredoxinⅡmRNA序列(Accession No：BC002034)设计引物，对小鼠生发泡完整卵细胞(GV卵)中的PeroxiredoxinⅡ可能编码区进行扩增。同时，取生后3d和2月小鼠的卵巢，免疫细胞化学染色显示PeroxiredoxinⅡ蛋白在卵泡中的分布。此外，运用RT-PCR和免疫细胞化学染色方法观察PeroxiredoxinⅡ在植入前胚的表达。结果从GV卵中扩增所得684bp的cDNA序列，与小鼠PeroxiredoxinⅡ具有99％同源性；其推导的编码氨基酸序列与小鼠PeroxlredoxinⅡ氨基酸序列完全相同。免疫细胞化学染色显示：生后3d小鼠卵巢内未见PeroxiredoxinⅡ阳性反应；2月小鼠卵巢内阳性反应见于初级卵泡、次级卵泡和近成熟卵泡中卵母细胞的胞质。卵泡细胞未见PeroxiredoxinⅡ阳性反应。RT-PCR结果表明：PeroxiredoxinⅡmRNA在GV卵中处高水平，从MII卵开始略有下降，在4-细胞胚和早期囊胚期间未检到。免疫细胞化学染色显示：GV卵、MII卵、1-细胞胚、2-细胞胚、4-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚和早期囊胚均呈PeroxiredoxinⅡ阳性反应。结论PeroxiredoxinⅡmRNA和蛋白在小鼠植入前胚的表达存在时程差别，PeroxiredoxinⅡ蛋白是母源性蛋白，它可能参与小鼠卵巢中卵母细胞和早期胚发育过程的调节。