STAT3靶向短发夹RNA干扰重组载体对结肠癌SW480细胞的沉默作用 |
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引用本文: | 王朝阳,崔春晖,姚晓军,黄宗海.STAT3靶向短发夹RNA干扰重组载体对结肠癌SW480细胞的沉默作用[J].中国老年学杂志,2010,30(3). |
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作者姓名: | 王朝阳 崔春晖 姚晓军 黄宗海 |
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作者单位: | 南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,510280 |
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摘 要: | 目的 探讨STAT3基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对结肠癌SW480细胞STAT3基因的干扰作用.方法 根据siRNA设计原则,构建靶向STAT3基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/STAT3),使用脂质体法转染人结肠癌细胞系(SW480),通过RT-PCR和 Western 印迹检测结肠癌SW480细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平.结果 pGPU6/GFP/STAT3重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确.质粒成功转染SW480细胞后,该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05).结论 成功构建靶向STAT3基因的shRNA表达载体,转染SW480细胞,能有效抑制细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供前期的实验依据.
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关 键 词: | 结肠癌 RNA干扰 基因表达 |
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