| 不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA |
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| 引用本文： | 孙志涛,;牛维,;何升华,;林定坤. 不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA[J]. 中国临床康复, 2014, 0(51): 8201-8205 |
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| 作者姓名： | 孙志涛, 牛维, 何升华, 林定坤 |
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| 作者单位： | [1]深圳市中医院,广东省深圳市518000; [2]广东省中医院骨三科,广东省广州市510120 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81173285） |
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| 摘 要： | 背景：目前文献报道的软骨RNA提取有多钟方法,国内文献报道多为经典Trizol法,在实验中发现该方法提取的RNA并不能满足后续实验的需要。目的：探索不同方法提取SD大鼠软骨组织总RNA的区别。方法：选取3月龄SD大鼠9只,分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout试剂盒和经典Trizol法对软骨组织进行总RNA提取,并通过RNA琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,以探寻软骨总RNA最佳提取方案。结果与结论：Trizol法提取的RNA A260/A280值为1.58,说明纯度不高;RNAout法提取的RNA,由于软骨含有大量的蛋白多糖和胶原,也不能满足后续实验的需要;RNeasyMini Kit法和肝（Trizol）法提取RNA的A260/A280值分别为2.00和1.98,说明提取的总RNA或核酸的纯度高。RNA的完整性电泳结果显示,RNeasyMini Kit法、RNAout法和肝（Trizol）法可见28 s、18 s及5 s条带,而Trizol法未见任何条带,RNAout法28 s和18 s条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit法获得的总RNA纯度高、完整性和稳定性好,并能成功反转录合成双链c DNA,而RNAout试剂盒和经典Trizol法获得的总RNA不能满足后续实验需要。
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| 关 键 词： | 软骨 RNA 大鼠 组织构建 软骨组织构建 RNA提取 国家自然科学基金 |
Different methods to extract total RNA from the knee cartilage tissue of Sprague-Dawley rats |
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| Affiliation: | Sun Zhi-tao, Niu Wei, He Sheng-hua, Lin Ding-kun (1 Shenzhen Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shenzhen 518000, Guangdong Province, China; 2Third Department of Orthopedics, Guangdong Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China) |
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