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不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA
引用本文:孙志涛,;牛维,;何升华,;林定坤. 不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA[J]. 中国临床康复, 2014, 0(51): 8201-8205
作者姓名:孙志涛,  牛维,  何升华,  林定坤
作者单位:[1]深圳市中医院,广东省深圳市518000; [2]广东省中医院骨三科,广东省广州市510120
基金项目:国家自然科学基金项目(81173285)
摘    要:背景:目前文献报道的软骨RNA提取有多钟方法,国内文献报道多为经典Trizol法,在实验中发现该方法提取的RNA并不能满足后续实验的需要。目的:探索不同方法提取SD大鼠软骨组织总RNA的区别。方法:选取3月龄SD大鼠9只,分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout试剂盒和经典Trizol法对软骨组织进行总RNA提取,并通过RNA琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,以探寻软骨总RNA最佳提取方案。结果与结论:Trizol法提取的RNA A260/A280值为1.58,说明纯度不高;RNAout法提取的RNA,由于软骨含有大量的蛋白多糖和胶原,也不能满足后续实验的需要;RNeasyMini Kit法和肝(Trizol)法提取RNA的A260/A280值分别为2.00和1.98,说明提取的总RNA或核酸的纯度高。RNA的完整性电泳结果显示,RNeasyMini Kit法、RNAout法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s及5 s条带,而Trizol法未见任何条带,RNAout法28 s和18 s条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit法获得的总RNA纯度高、完整性和稳定性好,并能成功反转录合成双链c DNA,而RNAout试剂盒和经典Trizol法获得的总RNA不能满足后续实验需要。

关 键 词:软骨  RNA  大鼠  组织构建  软骨组织构建  RNA提取  国家自然科学基金

Different methods to extract total RNA from the knee cartilage tissue of Sprague-Dawley rats
Affiliation:Sun Zhi-tao, Niu Wei, He Sheng-hua, Lin Ding-kun (1 Shenzhen Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shenzhen 518000, Guangdong Province, China; 2Third Department of Orthopedics, Guangdong Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China)
Abstract:
Keywords:
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