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| GJB6在hela细胞的互作蛋白的研究 | |
| 引用本文： | 贺定华,冯永,夏昆,贺楚峰,梅凌云.GJB6在hela细胞的互作蛋白的研究[J].中国耳鼻咽喉颅底外科杂志,2008,14(2):91-95. |
| 作者姓名： | 贺定华 冯永 夏昆 贺楚峰 梅凌云 |
| 作者单位： | 1. 中南大学湘雅医院,耳鼻咽喉科,湖南,长沙,410008;湖南省儿童医院,耳鼻咽喉科,湖南,长沙,410007 2. 中南大学湘雅医院,耳鼻咽喉科,湖南,长沙,410008 3. 中国医学遗传学国家重点实验室,湖南,长沙,410078 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 国家高技术研究发展计划(863计划) , 湖南省卫生厅科研项目 |
| 摘 要： | 目的 为探讨GJB6的组装、运输、膜定位及间隙连接通道形成的可能机制,在hela细胞筛选GJB6的C-端功能域的互作蛋白.方法 以正常人DNA为模板,PCR扩增GJB6(CX30)的211～261氨基酸编码区,即C-端功能域,构建pGEX-4T-2-GJB6(211～261)-GST原核融合表达载体,纯化融合蛋白和GST蛋白,以纯化的融合蛋白和GST蛋白分别与hela细胞的裂解蛋白进行孵育以沉降(pull down)互作蛋白,SDS-PAGE分离互作蛋白.结果 构建了pGEX-4T-2-GJB6(211～261)-GST原核融合表达载体,纯化了融合蛋白及GST蛋白,但在对沉降所得蛋白进行SDS-PAGE分离、检测及比较,未发现明显差异蛋白条带.结论 本实验虽未能在hela细胞筛选到GJB6的C-端功能域的互作蛋白,但构建了融合表达载体,纯化了融合蛋白及GST,为进一步GJB6的互作蛋白筛选打下了基础. |
| 关 键 词： | GJB6 互作蛋白 GST-pull down hela细胞 hela cell 细胞 互作蛋白 研究 protein interact 蛋白筛选 实验 白条 差异 发现 比较 检测 白及 结果 分离 pull 沉降 孵育 融合蛋白 |
| 文章编号： | 1007-1520(2008)02-0091-05 |
Screening interact protein of GJB6 in hela cell |
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