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应用重组抗原(rSAG1)检测IgM抗体诊断弓形虫病的研究
引用本文:谈永飞,印鑫,汤俊明,司进,徐明,殷旭仁,曹国群,梁幼生,朱荫昌.应用重组抗原(rSAG1)检测IgM抗体诊断弓形虫病的研究[J].中国血吸虫病防治杂志,2004,16(2):133-136.
作者姓名:谈永飞  印鑫  汤俊明  司进  徐明  殷旭仁  曹国群  梁幼生  朱荫昌
作者单位:1. 江苏省宜兴市第一人民医院,宜兴,214200
2. 江苏省寄生虫病防治研究所
基金项目:江苏省重点学科建设项目,江苏省重点实验室基金
摘    要:目的以刚地弓形虫RH株重组主要表面抗原1作为检测抗原,建立检测弓形虫IgM抗体的rSAG1-ELISA.方法用Ni2 螯合柱纯化重组抗原rSAGI;以不同浓度的rSAG1的包被聚苯乙烯酶标条,阳性和阴性混合血清分别作1:100和1:200稀释,以辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM为二抗,采用正交试验确定rSAG1-ELISA的最佳检测条件;按其最佳检测条件分别对弓形虫IgM阳性和阴性混合血清重复测20次进行精确度的检测;采用抗体抑制试验检测其特异性;同时对用进口试剂盒筛得的35份弓形虫IgM阳性血清和57份弓形虫IgM阴性血清进行检测.结果 制备的rSAG1重组蛋白纯度在90%以上;rSAG1-ELISA的最佳检测条件为:rSAG1的包被浓度为2.5μg/m1,血清稀释度1:100,酶标记的羊抗人IgM 1:4 000稀释;用rSAG1-ELISA对混合弓形虫IgM阳性和阴性血清的重复检测表明:IgM阳性混合血清检测值的变异系数(CV值)为13.8%,IgM阴性混合血清的CV值为7.7%;灵敏度检测表明血清稀释度在1:50~1:200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为62.0%;rSAG1-ELISA与进口试剂盒的总符合率为88.0%,其中阳性和阴性符合率分别为82.9%(29/35)和91.2%(52/57).结论 rSAG1-ELISA具有较好的灵敏度和特异性,与进口试剂盒相比有较高的符合率,表明该法对弓形虫病早期诊断具有较高的价值,可进一步推广应用.

关 键 词:弓形虫病  重组抗原  酶联免疫吸附试验  免疫诊断
文章编号:1005-6661(2004)02-0133-04
修稿时间:2004年1月12日

DETECTION OF IgM ANTIBODY WITH RECOMBINANT ANTIGEN rSAG1 FOR TOXOPLASMOSIS DIAGNOSIS
Tan Yongfei ,Yin Xin ,Tang Junming ,Si Jin ,Xu Ming ,Yin Xuren ,Cao Guoqun ,Liang Yousheng ,Zhu Yinchang.DETECTION OF IgM ANTIBODY WITH RECOMBINANT ANTIGEN rSAG1 FOR TOXOPLASMOSIS DIAGNOSIS[J].Chinese Journal of Schistosomiasis Control,2004,16(2):133-136.
Authors:Tan Yongfei  Yin Xin  Tang Junming  Si Jin  Xu Ming  Yin Xuren  Cao Guoqun  Liang Yousheng  Zhu Yinchang
Affiliation:Tan Yongfei 1,Yin Xin 1,Tang Junming 1,Si Jin 2,Xu Ming 2,Yin Xuren 2,Cao Guoqun 2,Liang Yousheng 2,Zhu Yinchang 2
Abstract:
Keywords:IgM
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