| pQE-TGF-β1原核表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 孙大铭,侯树勋,张春莉,杜桂鑫,付小兵.pQE-TGF-β1原核表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达[J].中国矫形外科杂志,2003,11(21):1490-1492. |
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| 作者姓名： | 孙大铭 侯树勋 张春莉 杜桂鑫 付小兵 |
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| 作者单位： | 解放军第304医院全军骨科研究所,北京,100037 |
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| 基金项目： | 国家 973课题资助项目 (G1 9990 542 0 4 ) |
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| 摘 要： | 目的：为了解人的TGF-β1基因的功能及生物学活性，制备具有生物学活性的TGF-β1蛋白。方法：用基因重组技术构建pQE30-TGF-β1原核表达载体，并在M15大肠杆菌中进行表达，利用Ni-NTA琼脂柱纯化TGF-β1单体，通过复性得到双体蛋白，利用MTT方法对复性的蛋白进行活性测定.结果：经酶切鉴定及测序结果证明pQE30载体上成功地插入了TGF-β1成熟肽基因片段。pQE30-TGF-β1原核表达载体在大肠杆菌中得到了高效表达，表达量约占全菌蛋白的20％，表达得TGF-β1单体蛋白经纯化后进行SDS-PAGE电泳显示均得到了一条蛋白带，分子量为15KD左右。MTT测活证明TGF-β1单体蛋白经复性后具有良好的活性。结论：pQE30-TGF-β1原核表达载体的构建及重组TGF-β1蛋白的制备，为深入了解TGF-β1的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | TGF-β1基因 原核表达质粒 大肠杆菌 生物学活性 基因重组 MTT法 融合蛋白 骨损伤修复 |
| 文章编号： | 1005-8478(2003)21-1490-03 |
| 修稿时间： | 2003年4月1日 |
The Construction of pQE-TGF-β1 Recombinant Expression Plasmids and Expression in Escherichia Coli |
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| SUN Da-ming,HOU Shu-xun,ZHANG Chun-li,et al..The Construction of pQE-TGF-β1 Recombinant Expression Plasmids and Expression in Escherichia Coli[J].The Orthopedic Journal of China,2003,11(21):1490-1492. |
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| Authors: | SUN Da-ming HOU Shu-xun ZHANG Chun-li |
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| Institution: | SUN Da-ming,HOU Shu-xun,ZHANG Chun-li,et al.The Orthopedic Institute of PLA,the 304 th Hospital of PLA,Beijing 100037 |
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