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siRNA对HSC结缔组织生长因子的抑制作用
引用本文:李光明,谢青,史毅,李定国,金由辛. siRNA对HSC结缔组织生长因子的抑制作用[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2005, 25(2): 116-119
作者姓名:李光明  谢青  史毅  李定国  金由辛
作者单位:上海第二医科大学新华医院消化内科,上海第二医科大学瑞金医院感染科,中国科学院上海生命研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室,上海第二医科大学新华医院消化内科,中国科学院上海生命研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 上海200092,上海200092
摘    要:目的研究化学合成的小分子干扰RNA (siRNA)对鼠肝星状细胞 (HSC)结缔组织生长因子 (CTGF)基因表达的抑制作用。方法针对大鼠CTGFmRNA 4 83、885和 94 6位点化学合成 3对 2 1核苷酸 (nt)siRNA ,分别以 5 0、10 0、2 0 0nmol/L浓度转染HSCT6 ,以空白及转染非特异siRNA作为对照 ,应用RT PCR检测CTGFmRNA表达 ,筛选出抑制效率最高的siRNA及其浓度 ;再转染HSCT6 ,抽提孵育 2 4、4 8、72h细胞总RNA及蛋白质 ,应用RT PCR和Westernblot检测CTGFmRNA及蛋白质表达。结果与对照相比 ,转染siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA表达水平明显降低 ,siRNA抑制效率在 5 0 ~2 0 0nmol/L范围呈浓度依赖性增高 ,以 4 83siRNA 2 0 0nmol/L最显著 ,转染非特异siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA表达水平无明显变化 ;转染 4 83siRNA的HSCT6细胞 2 4  4 8、72hCTGFmRNA分别下调 (91± 2 ) %、(6 5± 3) % (P均 <0 .0 1)和 (10± 7) % (P =0 .0 6 34) ,蛋白分别下调 (86± 5 ) %、(94± 4 ) %和 (4 2± 9) % (P均 <0 .0 1)。结论化学合成 4 83siRNA能高效抑制HSC的CTGF基因表达 ,有效阻抑时间达 72h,提示化学合成siRNA具有预防和治疗肝纤维化的潜力

关 键 词:mRNA表达 CTGF 转染 HSCT 结缔组织生长因子 化学合成 细胞 阻抑 小分子 总RNA
文章编号:0258-5898(2005)02-0116-04
修稿时间:2004-05-08

Inhibition Effect of Chemically Synthetic siRNA on Connective Tissue Growth Factor in HSC
LI Guang-ming ,XIE Qing ,SHI Yi ,LI Ding-guo ,JIN You-xin. Inhibition Effect of Chemically Synthetic siRNA on Connective Tissue Growth Factor in HSC[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2005, 25(2): 116-119
Authors:LI Guang-ming   XIE Qing   SHI Yi   LI Ding-guo   JIN You-xin
Affiliation:LI Guang-ming 1,XIE Qing 2,SHI Yi 3,LI Ding-guo 1,JIN You-xin 3
Abstract:
Keywords:connective tissue growth factor  small interfering RNA  RNA interference
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