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核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达
引用本文:张园,李晓眠,王华.核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达[J].中国新药杂志,2008,17(23):2031-2033.
作者姓名:张园  李晓眠  王华
作者单位:1. 天津医科大学基础医学院医学微生物教研室,天津,300070;天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心,天津,300191
2. 天津医科大学基础医学院医学微生物教研室,天津,300070
3. 天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心,天津,300191
摘    要:目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAXl-F,并在COS 7细胞中表达.方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoR Ⅰ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS 7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达.结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致.重组质粒pVAX1-F转染COS 7细胞72 h后,能够表达抗原蛋白,流式细胞术检测达到58.3%,与对照组3.6%比较差异具有显著性(P<0.01),且F基因mRNA明显表达.结论:成功构建pVAX1-F,并能够在COS 7细胞中瞬时表达,为仙台病毒F基因核酸疫苗进行免疫学评价奠定基础.

关 键 词:仙台病毒  核酸疫苗  F基因

Construction and expression of DNA vaccine for pVAX1-F virus
ZHANG Yuan,LI Xiao-mian,WANG Hua.Construction and expression of DNA vaccine for pVAX1-F virus[J].Chinese Journal of New Drugs,2008,17(23):2031-2033.
Authors:ZHANG Yuan  LI Xiao-mian  WANG Hua
Institution:ZHANG Yuan1,2,LI Xiao-mian1,WANG Hua2(1 Basic Medical College of Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China,2 Tianjin Entry-Exit Inspection , Quarantine Bureau,Tianjin 300191,China)
Abstract:
Keywords:Sendai virus  DNA vaccine  F gene  
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