TGFβ1基因对肝癌细胞癌基因表达的体外观察

目的:观察转化生长因子β1(TGFβ1)转入对人肝癌细胞系癌基因表达的影响。方法:pL（TGFβ1）SN和相应重组病毒上清用脂质体转染包装细胞及肝癌细胞,经G418筛选后,进行免疫组化染色,观察癌基因蛋白表达的改变。结果:提取的TGFβ1cDNA连接物经酶切鉴定,证明有正向插入及反向插入两类。病毒上清TGFβ1含量在16-41ng/ml,套式PCR后均出现290bp条带。转基因后肝癌细胞癌基因蛋白免疫组化染色结果:c-myc,c-met及ras癌基因表达,反向TGFβ1转入者为(+)？(++),而正向转入均为(-)。免疫组化检测其TGFβ1表达蛋白,空白对照染色(±),正向则为(++)。结论:正向插入的TGFβ1cDNA可使癌基因c-myc,c-met及ras表达减少,提示它在体外对肝癌细胞具有负调控作用。