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半边旗二萜类化合物5F诱导人翼状胬肉成纤维细胞凋亡及对caspase-3表达的研究
引用本文:林意玲,吴平,廖海兰,张培华,何惠娟,江黎明. 半边旗二萜类化合物5F诱导人翼状胬肉成纤维细胞凋亡及对caspase-3表达的研究[J]. 中国药学杂志, 2006, 41(13): 993-997
作者姓名:林意玲  吴平  廖海兰  张培华  何惠娟  江黎明
作者单位:1. 广东医学院附属医院眼科,广东,湛江,524001
2. 广东医学院附属医院中心实验室,广东,湛江,524001
3. 广东医学院整形外科研究所,广东,湛江,524001
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);广东省科技厅科技攻关项目
摘    要: 目的观察半边旗二萜类化合物5F(5F)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)的致凋亡作用及其对凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达的影响。方法采用5F不同药物浓度组(0,8,32,128 mg·L-1)作用不同时间处理细胞。噻唑蓝比色法检测5F对细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;RT-PCR检测细胞内凋亡相关基因caspase-3的转录水平;Western blot检测细胞caspase-3蛋白表达;化学比色法检测细胞凋亡过程中caspase-3活性的变化。结果给药组细胞的生长与对照组相比均受到显著的抑制(P<0.01),细胞增殖抑制率呈剂量和时间的依赖关系;Hoechst33258荧光染色显示,给药组部分细胞呈典型的凋亡表现;流式细胞术检测在32 mg·L-1浓度作用下,12 h即出现“凋亡峰”,其峰值达(12.48±1.29)%;RT-PCR检测发现细胞内凋亡相关基因caspase-3 mRNA表达上调;Western blot检测细胞caspase-3蛋白表达水平升高;caspase-3活性检测显示,其活性呈剂量和时间依赖性增高,5F浓度达到128 mg·L-1时,其活性为对照组的3.52倍。结论5F可显著地抑制HPF增殖、诱导细胞凋亡、升高caspase-3活性,并呈明显的量效与时效关系;其诱导细胞凋亡的作用机制可能与升高caspase-3活性,促进caspase-3基因转录和蛋白翻译,使细胞内caspase-3增加从而促进细胞凋亡有关。

关 键 词:半边旗  二萜类  翼状胬肉  成纤维细胞  凋亡  半胱氨酸蛋白酶3
文章编号:1001-2494(2006)13-0993-05
收稿时间:2005-10-18
修稿时间:2005-10-18

Experimental Research of Apoptosis in Pterygium Fibroblasts Induced by 5F and Effect on the Expression of Caspase-3
LIN Yi-ling,WU Ping,LIAO Hai-lan,ZHANG Pei-hua,HE Hui-juan,JIANG Li-ming. Experimental Research of Apoptosis in Pterygium Fibroblasts Induced by 5F and Effect on the Expression of Caspase-3[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2006, 41(13): 993-997
Authors:LIN Yi-ling  WU Ping  LIAO Hai-lan  ZHANG Pei-hua  HE Hui-juan  JIANG Li-ming
Affiliation:a.Department of Ophthalmology;b.Central Laboratory;c.Institute of Reparative Surgery;Guangdong Medical College,Zhanjiang 524001,China
Abstract:
Keywords:Peris semipinnata L  diterpeniod  pterygium  fibroblasts  apoptosis  caspase-3
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