| 新锌指蛋白基因Zfp637真核表达质粒的构建及对乳腺癌EMT6细胞的作用 |
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| 引用本文： | 李凯,任婧婧,张洁,刘凯,齐彦宇,王修杰,肖恒怡,林苹. 新锌指蛋白基因Zfp637真核表达质粒的构建及对乳腺癌EMT6细胞的作用[J]. 四川大学学报(医学版), 2009, 40(4) |
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| 作者姓名： | 李凯 任婧婧 张洁 刘凯 齐彦宇 王修杰 肖恒怡 林苹 |
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| 作者单位： | 四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041;四川大学华西医院,生物治疗国家重点实验室,老年医学研究室,成都,610041 |
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| 基金项目： | 华西医院回国人员启动基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建锌指蛋白 Zfp637真核表达质粒及稳定转染过表达细胞,并观察 Zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响.方法 以正常小鼠脾脏组织cDNA作为模板扩增 Zfp637 DNA,定向插入到pEGFP-C3真核表达质粒中,酶切片段分析和测序鉴定以确定成功构建pEGFP- Zfp637重组质粒,通过脂质体介导pEGFP-Zfp637重组质粒转染小鼠乳腺癌株EMT6细胞,并且通过G418筛选出稳定转染细胞( Zfp637-EMT6).荧光显微镜下对Zfp637进行亚细胞定位;RT-PCR检测Zfp637-EMT6细胞中Zfp637基因表达;同时观察细胞生长状况,MTT法测定Zfp637-EMT6细胞的增殖活性.结果 重组质粒经鉴定证实具有Zfp637全长cDNA序列,所建立的Zfp637-EMT6细胞能稳定过表达 Zfp637基因,并且其细胞生长增殖显著增加.结论 成功构建pEGFP-Zfp637真核表达质粒,显示了 Zfp637能促进肿瘤细胞增殖,为进一步研究Zfp637基因的功能奠定了基础,并将为恶性肿瘤的基因治疗提供新靶点.
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| 关 键 词： | 锌指蛋白637基因 乳腺癌EMT6细胞 稳定转染 细胞增殖 |
Construction of Eukaryotic Expression Plasmid for a Novel Zinc Finger Protein Gene Zfp637 and Its Effect on Breast Carcinoma Cell EMT6 |
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| LI Kai,REN Jing-jing,ZHANG Jie,LIU Kai,QI Yan-yu,WANG Xiu-jie,XIAO Heng-yi,LIN Ping. Construction of Eukaryotic Expression Plasmid for a Novel Zinc Finger Protein Gene Zfp637 and Its Effect on Breast Carcinoma Cell EMT6[J]. Journal of Sichuan University. Medical science edition, 2009, 40(4) |
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| Authors: | LI Kai REN Jing-jing ZHANG Jie LIU Kai QI Yan-yu WANG Xiu-jie XIAO Heng-yi LIN Ping |
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