| Marcksl1基因敲除对小鼠成年造血的影响 |
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| 作者姓名： | 高丽娟 李博 于磊 齐晓龙 张旭 高珊 刘宁 马元武 |
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| 作者单位： | 1. 北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室;2. 北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家人类疾病动物模型资源库 |
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| 摘 要： | 目的 建立造血系统特异性Marcksl1敲除小鼠，探究该基因敲除对小鼠成年造血的影响。方法 对E15.5 Marcskl1敲除小鼠进行胎肝竞争性移植实验，分析胎肝移植后不同月龄小鼠外周血中成熟功能谱系血细胞的占比。流式分选胎肝KSL细胞，利用RNA-Seq分析该基因敲除后差异基因表达。利用CRISPR/Cas9技术，构建Marcksl1条件敲除小鼠，并与Vav1-Cre小鼠杂交，获得造血系统特异性Marcksl1敲除小鼠。利用PCR和Sanger测序鉴定基因型。利用Real-time PCR检测小鼠骨髓和造血干细胞中Marcksl1 mRNA的表达。利用流式细胞技术分析小鼠骨髓、外周血、脾和胸腺中不同类型造血细胞的占比。通过竞争性骨髓移植实验分析Marcksl1敲除对造血重建的影响。结果 Marcksl1敲除造成胎肝移植后B细胞占比下降、髓系细胞占比升高，骨髓中CLP和CMP占比下降、GMP占比升高。RNA-seq结果显示该基因敲除后导致胎肝KSL细胞中252个基因上调，400个基因下调。GO结果显示差异基因主要富集在免疫应答、质膜以及低压门钙离子通道活性等相关基因。KEGG结果显示差...
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| 关 键 词： | 豆蔻酰化的富含丙氨酸C激酶底物蛋白1 Marcksl1 条件敲除小鼠 造血干细胞 骨髓移植 |
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