外源性TNF-α基因克服多药耐药性的初步研究

目的：探索外源性细胞因子TNF－α基因克服多药耐药（multidrug resistnce,MDR)的新途径。方法：以重组逆转录病毒为载体，将TNF－α基因导入具MDR表型的人乳腺癌细胞系MCF－7／Adr ,经G418抗性筛选获阳性克隆MCF－7／Adr－TNF1与MCF－7／Adr－TNF2。以PCR和ELISA法检测目的基因的整合与表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变。MTT法检测外源性TNF－α基因的逆转MDR作用，流式细胞仪分析细胞内ADR积累的变化。结果：MCF－7／Adr－TNF1GN MCF－7／Adr－TNF2细胞中有TNF－α基因的整合和表达，病毒上清中TNF－α含量分别为1737pg/ml(10^6cells/48h)、2875pg/ml。与阴性对照细胞相比，MCF－7／Adr－TNF1GN MCF－7／Adr－TNF2细胞的生长速度明显减慢，生长抑制率分别为32．4％、54．8％，对ADR的耐药性明显降低，耐药逆转倍数分别为5．2倍、19．3倍，细胞内ADR的积累明显增加。结论：外源性TNF－α基因的导入能有效克服耐药性，增加细胞内药物的积累为其逆转耐药性的主要机制。