| 人转化生长因子-β1基因克隆、测序及真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 金善爱,柴红梅,崔极哲,杨波,吴宏,柳忠辉,张晓光.人转化生长因子-β1基因克隆、测序及真核表达载体的构建[J].吉林医学,2008,29(23):2155-2158. |
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| 作者姓名： | 金善爱 柴红梅 崔极哲 杨波 吴宏 柳忠辉 张晓光 |
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| 作者单位： | [1]吉林大学第二医院麻醉科,吉林长春130041 [2]吉林大学第二医院眼科,吉林长春130041 [3]吉林大学基础医学部免疫教研室,吉林长春130021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助课题(30500548) |
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| 摘 要： | 目的：克隆人转化生长因子-β1（TGF-β1）基因编码区cDNA序列，构建并鉴定TGF-β1真核表达载体。方法：设计含有EcoRI和Xhol Ⅰ酶切位点的TGF-β1 cDNA引物，利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，以人白细胞mRNA为模版，扩增TGF-β1基因，纯化PCR产物，TA克隆，双酶切与pcDNA3质粒表达载体连接，转化感受态大肠杆菌JM109，酶切鉴定阳性董组子，并进行序列测定。结果：琼脂糖凝胶电泳显示，用双酶切后形成分子量1．2kb的条带，符合物理图谱，表明表达载体构建成功，序列测定结果与预测结果完全一致。结论：成功克隆了TGF-β1基因，并成功地构建了真核表达载体pcDNA3-TGF-β1.
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| 关 键 词： | 转化生长因子-β1 基因克隆 逆转录聚合酶链反应 pcDNA3-TGF-β1 真核表达载体 |
Gene cloning and construction of expression vector for human TGF-β_1 |
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| JIN Shan-ai,CAI Hong-mei,CUI Ji-zhe,et al.Gene cloning and construction of expression vector for human TGF-β_1[J].Jilin Medical Journal,2008,29(23):2155-2158. |
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| Authors: | JIN Shan-ai CAI Hong-mei CUI Ji-zhe |
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| Institution: | JIN Shan-ai1,CAI Hong-mei1,CUI Ji-zhe2,et al(1.Department of Anesthesiology,the Second Hospital of Jilin University,Changchun 130041,China,2.Department of Ophthalmology,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Transforming growth factor-β1 Gene cloning RT-PCR Eukaryotic expression |
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