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NF-κB结合位点突变对人NOD2基因启动子调控的影响
引用本文:孙丽萍,胡巢凤.NF-κB结合位点突变对人NOD2基因启动子调控的影响[J].现代免疫学,2010(1).
作者姓名:孙丽萍  胡巢凤
作者单位:暨南大学医学院病理生理学教研室发热研究室;
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(06025159); 广东省教育厅自然科学研究项目[粤财教(2005)126]; 暨南大学重点实验室基金资助项目(2006)
摘    要:探讨NF-κB结合位点突变对人NOD2基因启动子调控的影响。采用PCR技术从人基因组DNA中扩增含有NF-κB结合位点的人NOD2基因启动子序列,并定向克隆入已切除启动子的表达载体pEGFP-N3中,构建含有NF-κB结合位点的人NOD2基因启动子驱动的绿色荧光蛋白(green fluorescent proteins,GFP)载体pEGFP-N3-NOD2wt,并构建NF-κB结合位点2个碱基缺失突变的载体,将构建的重组质粒瞬时转染HEK293细胞,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果显示重组质粒转染HEK293细胞后,在倒置荧光显微镜下均能看到绿色荧光,其中pEGFP-N3-NOD2wt重组质粒在HEK293细胞中荧光表达较强,而突变质粒mpEGFP-N3-NOD2荧光强度明显减弱。说明NF-κB结合位点是驱动NOD2基因转录的重要元件,且在NOD2基因启动子的调控中发挥了正调节作用,为进一步研究NOD2基因表达及调控机制提供了新的思路。

关 键 词:人NOD2启动子  NF-κB结合位点  缺失突变  荧光表达
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