基因芯片分型中荧光标记引物的多重扩增及试验优化 |
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作者姓名: | 李健 丁志平 曾婷 文思远 乔平 张敏丽 王升启 |
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作者单位: | 1. 100853,北京,解放军总医院临床检验中心 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划课题资助项目(2002AA22341L) |
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摘 要: | 基因芯片技术以其平行高效多位点多态性分型的优势,在基础和临床研究中被广泛应用。然而,随着位点增多,扩增目的片段更繁琐,为了提高效率和降低成本,就需要在同一反应体系内进行多重扩增。而多重扩增的关键问题是,同一体系内引物对的最大化,并有效减少非特异扩增。目前,此环节可通过计算机辅助设计和尝试不同引物对组合解决。由于芯片分型以杂交信号强弱为检测指标,扩增片段要载有荧光剂,因此多重扩增必须考虑到荧光标记物——青色素(Cy3)的大分子位阻效应。但是,Cy3的存在不可避免地降低了PCR的效率,为此本研究对相关试验条件进行优化。
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关 键 词: | 荧光标记引物 基因芯片技术 扩增片段 试验条 多重 分型 优化 计算机辅助设计 |
收稿时间: | 2006-06-15 |
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