| 人骨形态发生蛋白2重组腺病毒载体的构建及其生物学活性检测 |
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| 引用本文： | 廉凯,胡蕴玉,李立文,李丹,白建萍,孟国林,吕荣.人骨形态发生蛋白2重组腺病毒载体的构建及其生物学活性检测[J].临床骨科杂志,2006,9(4):356-359. |
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| 作者姓名： | 廉凯 胡蕴玉 李立文 李丹 白建萍 孟国林 吕荣 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属襄樊医院骨科,湖北,襄樊,441021;第四军医大学西京医院全军骨科研究所,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 中国博士后科学基金资助项目(编号:中博基2001-11)1 |
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| 摘 要： | 目的构建人骨形态发生蛋白2(hBMP-2)重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2),并检测其转染后的骨髓基质细胞hBMP-2表达以及成骨能力的改变。方法采用Cre-lox重组方法构建含有hBMP-2基因的复制缺陷型重组腺病毒,并利用原位杂交和免疫组化手段观察转染后的骨髓基质细胞hBMP-2mRNA和蛋白表达情况;通过Ⅰ型胶原原位杂交、碱性磷酸酶测定、透射电镜观察以及裸鼠肌袋试验评价Ad-hBMP-2转染对兔骨髓基质细胞成骨能力的影响。结果病毒培养上清液的聚合酶链式反应证实构建的重组腺病毒含有Ad-hBMP-2基因,重组腺病毒滴度达3·8×1010pfu/L;感染增殖率为100的Ad-hBMP-2转染兔骨髓基质细胞24h和48h后即可分别检测到显著的hBMP-2mRNA和蛋白表达,转染效率几乎达100%;Ad-hBMP-2转染可以明显刺激兔骨髓基质细胞Ⅰ型胶原mRNA表达、碱性磷酸酶分泌、细胞内蛋白质合成以及异位骨形成等。结论Ad-hBMP-2具有高效转染能力,并能够诱导骨髓基质细胞向成骨细胞转化,进而促进骨形成。
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| 关 键 词： | 重组腺病毒载体 骨形态发生蛋白质类 转染 骨髓基质细胞 |
| 文章编号： | 1008-0287（2006）04-0356-04 |
| 收稿时间： | 2006-03-30 |
| 修稿时间： | 2006年3月30日 |
Construction of recombinant adenoviral vector encoding human BMP-2 and detection of its biological activities |
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| LIAN Kai,HU Yun-yu,LI Li-wen,LI Dan,BAI Jian-ping,MENG Guo-lin,LU Rong.Construction of recombinant adenoviral vector encoding human BMP-2 and detection of its biological activities[J].Journal of Clinical Orthopaedics,2006,9(4):356-359. |
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| Authors: | LIAN Kai HU Yun-yu LI Li-wen LI Dan BAI Jian-ping MENG Guo-lin LU Rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant adenoviral vector bone morphogenetic proteins transfection BMSCs |
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