转BMP-7基因BMSCs复合nHAC体外培养的实验研究 |
| |
引用本文: | 卢向东,郭庆华,刘强,李平.转BMP-7基因BMSCs复合nHAC体外培养的实验研究[J].骨科,2010,1(2). |
| |
作者姓名: | 卢向东 郭庆华 刘强 李平 |
| |
作者单位: | 山西医科大学第一医院骨科,太原,030001 |
| |
摘 要: | 目的 建立能够稳定表达骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的骨髓基质干细胞(BMSCs),并与纳米羟基磷灰石胶原(nHAC)材料复合培养体外构建组织工程骨.方法 用慢病毒把人BMP-7基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因导入大鼠BMSCs,用G418筛选获得阳性细胞后接种于nHAC支架体外复合培养.荧光显微镜下观察eGFP表达, 判断感染效率;以四唑盐(MTT)实验检测细胞活力;RT-PCR、ELISA检测目的基因表达;碱性磷酸酶(ALP)活性检测成骨能力;扫描电镜观察细胞在支架材料中的黏附、生长状况.结果 慢病毒24 h对BMSCs的转染率约为90%;MTT实验显示细胞活性较未转染组无明显差异(P>0.05);RT-PCR检测到BMP-7表达,在1 300 bp处出现特异性条带;ELISA检测24h BMP-7蛋白含量为(150.2±18.3)pg/ml;ALP活性以第16天左右最强;扫描电镜见细胞种植nHAC支架后粘附、生长良好.结论 BMP-7可在BMSCs内稳定表达,并诱导其向成骨分化;与nHAC复合培养可构建组织工程骨.
|
关 键 词: | 骨髓基质干细胞 骨形态发生蛋白-7 转染 |
In vitro co-culture of BMSCs transfected with lentivirus-mediated BMP-7 gene with nHAC scaffold |
| |
Abstract: | |
| |
Keywords: | |
本文献已被 万方数据 等数据库收录! |
|