| 聚乙烯吡咯烷酮无胶筛分毛细管电泳法分离鉴定DNA片段 |
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| 引用本文： | 伊茂礼,沈佐君,何晓东,刘广印. 聚乙烯吡咯烷酮无胶筛分毛细管电泳法分离鉴定DNA片段[J]. 上海医学检验杂志, 2006, 0(3) |
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| 作者姓名： | 伊茂礼 沈佐君 何晓东 刘广印 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学附属省立医院安徽省临床检验中心 安徽合肥230001 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金资助项目(050430902) |
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| 摘 要： | 目的在非涂层无胶筛分毛细管电泳中探讨一种简便快捷的分离鉴定DNA片段的新方法,以期更好的用于基因诊断。方法在非涂层无胶筛分毛细管电泳中,以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为筛分介质,用pUC19DNA/M sp l(HpaⅡ)标准DNA片段为实验对象,通过调节分离缓冲液中筛分介质的浓度、电泳缓冲液的pH值、运行电压及毛细管的温度,优化出分离26~501 bp DNA片段的最适条件。在此条件下分离了Y染色体无精症因子(AZF)区域4个位点的多重聚合酶链反应(PCR)扩增产物。结果PVP作为筛分介质在非涂层无胶筛分毛细管电泳中对于长度<501 bp的短链除了110和111 bp外均获得良好的分离效果,且迁移时间与碱基对数目呈良好线性关系。不但对多重PCR扩增产物实施了好的分离,而且依据碱基对数目与迁移时间之间的线性关系,对其大小也进行了精确的推断。结论PVP是一种良好的筛分介质,运用其进行无胶筛分毛细管电泳对于遗传性疾病的诊断将更加快速、准确、简便、灵敏。
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| 关 键 词： | 聚乙烯吡咯烷酮 无胶筛分 脱氧核糖核酸 毛细管电泳 |
Separation and characterization of DNA fragments by no-gel sieve capillary electrophoresis in using polyvinyl pyrrolidone as sieve media |
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| YI Maoli,SHEN Zuojun,HE Xiaodong,LIU Guangyin. Anhui Provincial Center for Clinical Laboratory,Anhui Provincial Hospital,Anhui Medical University,Anhui Hefei ,China. Separation and characterization of DNA fragments by no-gel sieve capillary electrophoresis in using polyvinyl pyrrolidone as sieve media[J]. Shanghai Journal of Medical Laboratory Sciences, 2006, 0(3) |
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| Authors: | YI Maoli SHEN Zuojun HE Xiaodong LIU Guangyin. Anhui Provincial Center for Clinical Laboratory Anhui Provincial Hospital Anhui Medical University Anhui Hefei China |
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| Affiliation: | YI Maoli,SHEN Zuojun,HE Xiaodong,LIU Guangyin. Anhui Provincial Center for Clinical Laboratory,Anhui Provincial Hospital,Anhui Medical University,Anhui Hefei 230001,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Polyvinyl pyrrolidone No-gel sieving DNA Capillary electrophoresis |
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