| APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用 |
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| 引用本文： | 王东,仲召阳,李增鹏,张沁宏,卿毅,杨宇馨.APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用[J].第三军医大学学报,2006,28(2):97-100. |
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| 作者姓名： | 王东 仲召阳 李增鹏 张沁宏 卿毅 杨宇馨 |
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| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所,肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所,肿瘤中心,重庆,400042 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目，第三军医大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的构建DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,观察其对骨肉瘤细胞HOS和9901APE1蛋白表达的抑制作用.方法设计合成APE1 siRNA cDNA序列与线性化pSilence 2.0-U6质粒连接后构建APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,经酶切鉴定和测序确认.应用免疫组化检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达,同时应用免疫印迹检测其对APE1基因的敲低作用的量效和时效关系.结果通过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了APE1 siRNA表达载体.免疫组化和免疫印迹证实pSilence APE1对骨肉瘤细胞APE1基因具有特异性"敲低"作用,其抑制APE1基因表达效率为72%～95%,而且其抑制作用以3.0μg pSilence APE1转染第3天最为显著.结论成功构建了APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,并且该载体能有效地敲低骨肉瘤细胞APE1基因表达.
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| 关 键 词： | 骨肿瘤 RNA干扰 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶 |
| 文章编号： | 1000-5404(2006)02-0097-04 |
| 修稿时间： | 2005年7月21日 |
Construction of APE1 siRNA expression vector and its inhibition to APE1 in osteosarcoma cells |
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| WANG Dong,ZHONG Zhao-yang,LI Zeng-peng,ZHANG Qin-hong,QING Yi,YANG Yu-xin.Construction of APE1 siRNA expression vector and its inhibition to APE1 in osteosarcoma cells[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2006,28(2):97-100. |
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| Authors: | WANG Dong ZHONG Zhao-yang LI Zeng-peng ZHANG Qin-hong QING Yi YANG Yu-xin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | osteosarcoma RNA interference apurinic/apyrimidinic endonuclease |
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