微小 RNA?34a调控儿童急性淋巴细胞白血病细胞 CEM/C1生长和迁移的分子机制研究

目的研究微小 RNA?34a(miR?34a)对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞 CEM/C1增殖、迁移的影响以及可能作用机制。方法选取重庆市第十三人民医院血液科 2017年 10月至 2018年 12月住院 32例 ALL病儿骨髓样本。另选取该院同期 25例原发性血小板减少症病儿的骨髓样本作为对照组。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测 miR?34a在 ALL骨髓样本的表达量； CEM/C1细胞按随机数字表法分为对照组、阴性对照(NC)组、 miR?34a组；对照组细胞常规培养， NC组和 miR?34a组 CEM/C1细胞分别在 Lipofectamine 2000介导下转染阴性对照质粒以及 miR?34a模拟物， qPCR检测转染效率；细胞计数试剂盒 8(CCK?8)实验检测 CEM/C1细胞的增殖， Transwell检测细胞迁移；在线软件 TargetScan预测 miR?34a与 Krüppel样因子 4(KLF4)的靶向关系，双荧光素酶报告基因进一步进行验证。结果与对照组相比， ALL骨髓样本中 miR?34a的表达量下调［(0.33±0.05)比(1.00±0.08)t＝15.680，P＜0.001］。与对照组(1.00±0.08)相比， NC组 miR?34a的表达量(0.99±0.08)无明显变化， miR?34a组 CEM/C1细胞中，miR?34a的表达量(3.21±0.23)上调(F＝423.135，P＜0.05)。对照组、 NC组、 miR?34a组细胞培养 48 h后细胞活性分别为(0.65±0.05)、(0.69±0.06)、(0.42±0.04)F＝40.818，P＜0.001；迁移细胞数分别为(142.36±12.47)个、(137.45±13.49)个、(79.89±6.23)个， F＝57.683，P＜0.001，差异计学意义。与 NC与 KLF4?wt共转染的细胞相比， miR?34a有统，与 KLF4?wt共转染的细胞荧光素酶活性［(0.45±0.03)比(1.00±0.06)t＝20.083，P＜0.001］降低；与 NC与 KLF4?mut共转染的细胞相比， miR?34a与 KLF4?mut共转染的细胞荧光素酶活性差异无统计学，意义［(1.03±0.07)比(1.01±0.07)，t＝0.495，P＞0.05)］。结论 miR?34a在 ALL中表达量下调，其可通过对靶基因 KLF4的调控影响 CEM/C1细胞增殖、迁移。