α7nAChR基因敲除HIV-1gp120转基因小鼠模型的构建

目的 通过构建双基因编辑小鼠模型（α7R-/-/gp120+），为探索α7乙酰胆碱受体（α7 nAChR）介导gp120中枢神经毒性的作用和机制提供研究基础。方法 α7 nAChR基因敲除小鼠（α7R-/-）与HIV-1 gp120转基因小鼠（gp120+）杂交（F0），从产生的F1小鼠中，选取基因型为α7R+/-/gp120+的小鼠进一步交配，得到F2小鼠。PCR法鉴定和筛选F3小鼠基因型，免疫组化分析双转基因动物模型蛋白表达；体外实验使用gp120蛋白和α7 nAChR抑制剂处理小胶质细胞，ELISA检测各组IL-1β与TNF-α表达情况。结 果 F3小鼠的PCR结果符合预期，其中有2只双基因编辑成功的小鼠。免疫组化结果显示双基因编辑小鼠（α7R-/-/gp120+）的脑组织缺乏α7 nAChR的同时高表达gp120蛋白。体外实验结果表明Gp120可促进小胶质细胞分泌IL-1β与TNF-α，而抑制α 7nAChR后IL-1β与TNF-α表达明显降低（P<0.001）。结论 α7R-/-/gp120+双基因修饰小鼠成功构建，且具有稳定遗传的特点，可为后续探索α7 nAChR介导gp120中枢神经毒性的作用和机制提供重要的动物模型。