人源脱细胞羊膜与脱细胞羊膜下层组织修复皮肤缺损

文题释义：脱细胞生物支架：其原理是将生物体原型组织中的实质细胞运用化学、酶解或机械方法给予去除后制成的构架，保留了以细胞间质为主的其他成分，维持了生物材料原有的机械性和可塑性，更加适合细胞黏附和增殖生长。 细胞毒性：是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程，如细胞膜或细胞骨架结构，细胞的新陈代谢过程，细胞组分或产物的合成、降解或释放，离子调控及细胞分裂等过程，导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱，所引发的不良反应。背景：羊膜与羊膜下层具有同源性且均属于医疗废物，均具有较低的免疫原性与一定的韧性，羊膜作为组织工程支架材料已有较多报道，但羊膜下层作为组织工程支架的研究较少。 目的：对比脱细胞羊膜与脱细胞羊膜下层分别复合骨髓间充质干细胞用于皮肤修复的差异。 方法：采用十二烷基硫酸钠+核酸酶法制作脱细胞羊膜下层材料，采用TritonX-100+胰酶法制作脱细胞羊膜材料。采用两种脱细胞材料浸提液分别培养骨髓间充质干细胞，利用CCK-8法检测两种脱细胞材料的细胞毒性。将骨髓间充质干细胞接种于2种脱细胞材料表面，光学显微镜与扫描电镜下观察细胞的生长与黏附。在每只SD大鼠一侧脊柱背部制作深达真皮层的皮肤缺损，将36只造模大鼠随机分为3组处理，每组12只：空白组不植入任何材料，对照组植入脱细胞羊膜与骨髓间充质干细胞复合物，观察组植入脱细胞羊膜下层与骨髓间充质干细胞复合物，术后7，14，21 d分别进行创面愈合率、创面病理及创面基因与蛋白检测。动物实验获得江南大学动物伦理委员会批准。结果与结论：①在培养的3-7 d内，两种脱细胞材料浸提液均可促进骨髓间充质干细胞的增殖；②光学显微镜与扫描电镜显示，骨髓间充质干细胞在两种脱细胞材料表面黏附、生长良好，细胞形态与培养瓶中培养的相同；③观察组与对照组术后各时间点的创面愈合率均高于空白组(P < 0.05)，且观察组高于对照组(P < 0.05)；④术后14 d的病理观察显示，观察组与对照组的皮肤修复优于空白组，且观察组优于对照组；⑤观察组、对照组术后各时间点的Ⅲ型胶原、CK18、Ⅰ型胶原与血管内皮生长因子基因表达量均高于空白组(P < 0.05)，且观察组高于对照组(P < 0.05)；⑥观察组、对照组各时间点的CK18、血管内皮生长因子蛋白表达均高于空白组(P < 0.05)，观察组高于对照组(P < 0.05)；⑦相较于脱细胞羊膜，脱细胞羊膜下层可促进皮肤的修复。ORCID: 0000-0001-5543-5392(王丹) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Human acellular amniotic membrane and acellular subamniotic membrane in repairing skin defects

BACKGROUND: Amniotic membrane and subamniotic membrane are homologous and belong to medical waste. They have low immunogenicity and certain toughness. Amniotic membrane as tissue-engineered scaffold material has been reported more, but the research of subamniotic membrane as tissue-engineered scaffold is less.