PI3K/Akt信号通路对高糖状态下视网膜Müller细胞的影响

目的　探讨PI3K/Akt信号通路对高糖状态下视网膜Müller细胞的影响及机制。方法　本实验分两部分，动物实验:雄性SD大鼠随机分成对照组、糖尿病组、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)组、IGF-1+LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂)组。后三组采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(50 mg·kg^-1)诱导成为糖尿病模型。模型诱导成功后，IGF-1组给予IGF-1 (80 g·L^-1) 5 μL玻璃体内注射给药，IGF-1+LY294002组给予5 μL(IGF-1+ LY294002)(80 μg·L^-1)玻璃体内注射给药。细胞实验:对培养的Müller细胞进行不同处理，分为对照组(空白对照)、高糖组(30 mmol·L^-1葡萄糖)、IGF-1组(30 mmol·L^-1葡萄糖+80 μg·L^-1 IGF-1)、IGF-1+LY294002组［30 mmol·L^-1葡萄糖+80 μg·L^-1(IGF-1+ LY294002)］。HE染色检测大鼠视网膜内核层(inner nuclear layer,INL)细胞密度，免疫荧光染色检测大鼠视网膜神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)表达及Müller细胞Caspase-3表达，TUNEL染色检测细胞凋亡情况，Western blot检测p-Akt、NF-κB、Caspase-3蛋白相对表达水平。结果　动物实验中，与对照组相比，糖尿病组及IGF-1+LY294002组GFAP表达均明显增加，INL细胞密度均明显降低(均为P<0.05)；与糖尿病组相比，IGF-1组GFAP表达明显下降，INL细胞密度明显增加(均为P<0.05)。细胞实验中，与对照组相比，高糖组及IGF-1+LY294002组细胞凋亡率和NF-κB、Caspase-3蛋白相对表达水平均明显增加，p-Akt蛋白相对表达均明显降低(均为P<0.05)；而与高糖组相比，IGF-1组细胞凋亡率、NF-κB及Caspase-3蛋白相对表达均明显下降，p-Akt蛋白相对表达明显增加(均为P<0.05)。结论　激活PI3K/Akt通路可对抗高糖状态下视网膜Müller细胞凋亡，其机制可能与下调NF-κB、Caspase-3蛋白表达有关。