| 柯萨奇病毒A组5型VP1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 靳卫平,卢佳,吴杰,胡岗,周金戈,王文辉,王泽鋆,孟胜利,申硕.柯萨奇病毒A组5型VP1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备[J].国际生物制品学杂志,2020,43(2):53-57. |
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| 作者姓名： | 靳卫平 卢佳 吴杰 胡岗 周金戈 王文辉 王泽鋆 孟胜利 申硕 |
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| 作者单位： | 武汉生物制品研究所病毒性疫苗研究一室 430207；国家联合疫苗工程技术研究中心，武汉 430207 |
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| 摘 要： | 目的 原核表达柯萨奇病毒A组5型(coxsackievirus A5,CV-A5)VP1蛋白,并制备抗VP1多克隆抗体(多抗),为CV-A5相关定性定量研究制备试剂。方法 逆转录PCR扩增N端截短的CV-A5VP1-ΔN56后,克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,获得pGEX-6P-1-VP1-ΔN56。将其转化大肠埃希菌BL21(DE3),表达重组蛋白并纯化。用纯化的谷胱甘肽巯基转移酶-VP1-ΔN56融合蛋白经背部皮下免疫日本大耳白兔,制备多抗。结果 重组表达载体构建成功,融合蛋白以不可溶包涵体存在。ELISA、蛋白质印迹法检测表明,获得的兔多抗效价为107,可特异性识别重组和天然CV-A5 VP1蛋白。结论 成功制备重组CV-A5 VP1蛋白及特异性多抗。为中和抗原表征研究及VP1定性定量分析奠定了基础。
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| 关 键 词： | 柯萨奇病毒A组5型 原核细胞 基因表达 多克隆抗体 VP1 |
Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of coxsackievirus A5 VP1 |
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| Jin Weiping,Lu Jia,Wu Jie,Hu Gang,Zhou Jinge,Wang Wenhui,Wang Zejun,Meng Shengli,Shen Shuo.Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of coxsackievirus A5 VP1[J].International Journal of Biologicals,2020,43(2):53-57. |
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| Authors: | Jin Weiping Lu Jia Wu Jie Hu Gang Zhou Jinge Wang Wenhui Wang Zejun Meng Shengli Shen Shuo |
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| Institution: | Research Division 1 of Viral Vaccines, Wuhan Institution of Biological Product Co., Ltd., Wuhan, 430207, China; National Engineering Technology Research Center of Combination Vaccines, Wuhan 430207, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Coxsackievirus A5 Prokaryotic cells Gene expression Polyclonal antibody VP1 |
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