灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化

文题释义：组织工程：主要研究种子细胞、生物材料、构建组织和器官4个方向，其核心是建立由细胞和生物材料构成的三维空间复合体，对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代，具有良好的发展前景和广阔的应用市场。牛心包脱细胞支架：经化学和物理方法去除牛心包中的细胞，形成无免疫原性或低免疫原性材料，构建组织工程支架。 背景：组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着，而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。 目的：观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法：将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素(青霉素/链霉素/两性霉素B溶液)的PBS、氯己定及体积分数75%乙醇进行灭菌处理。采用LB固体培养基评价4种方法的杀菌效果；采用VB染色评估4组处理对牛心包组织结构的影响；通过CCK-8实验测定4种处理抽提液的细胞毒性。将体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包制作为脱细胞支架，与人脐静脉内皮细胞共培养，观察细胞的黏附与内皮化效果。结果与结论：①体积分数75%乙醇和氯己定处理24 h的牛心包满足完全灭菌的要求，1%抗生素处理组和对照组可见明显菌落形成；②VB染色显示，体积分数75%乙醇、氯己定和1%抗生素处理的牛心包胶原纤维呈波浪状排列整齐，结构紧凑，弹性纤维含量较少但结构清晰；③体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包不影响L929细胞的增殖活性，培养1-3 d内的细胞存活率均在100%以上；氯己定灭菌处理的牛心包有很强的细胞毒性，导致细胞死亡；④人脐静脉内皮细胞可在脱细胞支架表面正常生长与黏附；在20 d的种植期内，第8-12天脱细胞支架表面黏附的细胞最多；⑤结果说明，体积分数75%乙醇能够有效消灭附着在牛心包上的所有微生物，不会影响牛心包的组织学完整性与生物相容性。ORCID: 0000-0002-3448-8230(刘飞) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Endothelialization of acellular scaffold from sterilized bovine pericardium

BACKGROUND: In the research of tissue engineering, there are inevitably various kinds of microorganisms attached to animal tissues, and asepsis is a basic requirement of clinical application of tissue engineering materials.