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miR-155干预烧伤急性肺损伤模型大鼠:核转录因子κB通路的变化
作者姓名:黎鸿章  杨 坤  刘玉文  刘 攀  邱 波  邹 杰
作者单位:内江市第一人民医院烧伤科,四川省内江市 641000
摘    要: 文题释义: miR-155:作用于靶基因抑制性κB激酶家族相关死亡域蛋白,减弱核转录因子κB活性,按照次级效应方式对炎性因子的释放产生抑制效果,降低机体损伤。 慢病毒载体:是以人类免疫缺陷Ⅰ型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。 背景:目前有研究关注核转录因子κB通路在烧伤大鼠急性肺损伤病理过程中的作用及机制,如miR-155靶向抑制KB激酶,进而减弱核转录因子κB活性,在烧伤大鼠急性肺损伤发挥作用,然而仍存在病理机制有待研究和确认。 目的:观察miR-155通过核转录因子κB通路对烧伤大鼠急性肺损伤的影响。 方法:采用温水水浴模拟烫伤法建立烧伤急性肺损伤大鼠模型,将烧伤大鼠随机分为烧伤急性肺损伤组、miR-155增强试剂组和miR-155抑制试剂组,液体复苏后,miR-155增强试剂组、miR-155抑制试剂组大鼠分别尾静脉注入5 μL的miR-155-mimics和miR-155-inhibitions。酶联免疫吸附剂测定肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的变化情况;苏木精-伊红染色法观察3组肺组织形态变化;Western blot法检测核转录因子κB及环氧化酶2蛋白表达;免疫组织化学染色检测肺组织核转录因子κB蛋白表达。 结果与结论:①苏木精-伊红染色结果表明,miR-155抑制试剂组、烧伤急性肺损伤组及miR-155增强试剂组肺组织损伤程度,逐渐加重(P < 0.05);②酶联免疫吸附实验结果表明,与烧伤急性肺损伤组相比,miR-155增强试剂组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β表达增加(P < 0.05),而miR-155抑制试剂组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β表达降低(P < 0.05);③Western结果表明,与烧伤急性肺损伤组相比,miR-155增强试剂组核转录因子κB、环氧化酶2蛋白表达增加(P < 0.05),而miR-155抑制试剂组核转录因子κB、环氧化酶2蛋白表达降低(P < 0.05);④免疫组织化学染色结果显示,miR-155抑制试剂组核转录因子κB蛋白表达增强,呈深棕色,中性粒细胞、单核巨噬细胞、肺泡上皮细胞的胞质及胞核内核转录因子κB表达最明显;⑤上述数据证实,肺组织细胞中核转录因子κB活性降低,可以通过下调miR-155来实现,从而降低肺损伤组织间的炎症反应。实验于2018年6月经内江市第一人民医院动物伦理委员会批准(批准号:1801270)。 ORCID: 0000-0002-3169-5146(黎鸿章) 中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

关 键 词:miR-155  大鼠  急性肺损伤  模型  核转录因子κB  环氧化酶2  炎症  白细胞介素1β  肿瘤坏死因子α  苏木精-伊红染色  
收稿时间:2019-03-26

Effect of miR-155 on acute lung injury in burned rats: changes of nuclear factor-kappa B pathway
Authors:Li Hongzhang  Yang Kun  Liu Yuwen  Liu Pan  Qiu Bo  Zou Jie
Institution:Department of Burn Plastic Surgery, the First People’s Hospital of Neijiang, Neijiang 641000, Sichuan Province, China
Abstract:BACKGROUND: Currently, studies have focused on the role and mechanism of nuclear factor-kappa B pathway in the pathological process of acute lung injury in burned rats, such as the targeting inhibition of κB kinase by miR-155, which further weakens the activity of nuclear factor-κB and plays a role in acute lung injury in burned rats. However, there are still some pathological mechanisms to be studied and confirmed.
Keywords:miR-155  rats  acute lung  injury  model  nuclear factor-κB  cyclooxygenase 2  inflammation    interleukin-1β  tumor necrosis factor-α  hematoxylin-eosin staining  
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