| 血浆microRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 李静,谭彩虹. 血浆microRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 国际检验医学杂志, 2015, 0(1): 57-59 |
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| 作者姓名： | 李静 谭彩虹 |
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| 作者单位： | 湖北文理学院医学院附属谷城县人民医院检验科,湖北襄阳,441700 |
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| 摘 要： | 目的建立特异、稳定且可靠的血浆microRNA(miRNAs)实时荧光定量PCR技术。方法收集10例健康人血浆标本,采用mirVanaTM PARIS kit试剂盒法提取血浆miRNAs,以miRNA特异的茎环引物引导逆转录,通过SYBR Green实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对外参照cel-miR-39、cel-miR-238及血浆miR-342-3p进行检测。结果健康人血浆miR-342-3p及外参cel-miR-39、cel-miR-238可以实现特异性扩增及定量。溶解曲线显示10例健康人血浆标本中cel-miR-39、cel-miR-238和miR-342-3p扩增产物分别在81.44、81.62、82.71℃时出现单一峰,无引物二聚体峰和其他非特异峰出现。血浆miR-342-3p批内批间重复性实验的标准差在0.13~0.20、变异系数(CV)在0.42%~0.66%,显示该方法重复性较好。以cel-miR-39、cel-miR-238作为外参照,同一血浆标本miR-342-3p的5次检测结果ΔCt的标准差为0.22、CV为1.68%,说明cel-miR0-39、cel-miR-238可作为血浆miRNAs实时荧光定量PCR检测的稳定外参。结论实时荧光定量PCR技术可作为研究血浆miRNAs较好的技术平台。
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| 关 键 词： | 实时荧光定量 血浆microRNAs 外参照 |
Establishment of quantitative PCR assay technique for plasma miRNA |
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| Li Jing,Tan Caihong. Establishment of quantitative PCR assay technique for plasma miRNA[J]. International Journal of Laboratory Medicine, 2015, 0(1): 57-59 |
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| Authors: | Li Jing Tan Caihong |
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| Affiliation: | Li Jing;Tan Caihong;Department of Clinical Laboratory,Affiliated Gucheng Country People′s Hospital,Hubei University of Arts and Science; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | real-time fluorescence quantitative plasma microRNAs exogenous reference |
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