人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白编码基因K8.1的分离、克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 曾怡,卢春,黄丽. 人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白编码基因K8.1的分离、克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2004, 24(2): 105-108 |
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作者姓名: | 曾怡 卢春 黄丽 |
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作者单位: | 南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏,南京,210029;南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏,南京,210029;南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏,南京,210029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30100160,30271179) |
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摘 要: | 目的:分离、克隆人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1编码基因,并置于大肠杆菌中作融合表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点,以佛波酯(TPA)刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增出K8.1编码基因,克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,构建含K8.1基因重组质粒。重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β—D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果:分离、克隆的411bp序列与基因数据库中所登记的HHV-8 K8.1序列呈现100%同源性。IPTG诱导后的菌体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),显示有一个41ku的融合表达蛋白产生。结论:HHV-8K8.1编码基因在E.coli中初步获得正确表达。
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关 键 词: | 人类疱疹病毒8型 包膜糖蛋白K8.1基因 原核表达 |
文章编号: | 1007-4368(2004)02-0105-04 |
修稿时间: | 2003-08-14 |
Isolation and Cloning of Envelope Glycoprotein K8.1 Gene of Human Herpesvirus-8 and Its Expression in E.Coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | human herpesvirus 8(HHV-8) envelope glycoprotein K8.1 gene prokaryotic expression |
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