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人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白编码基因K8.1的分离、克隆及在大肠杆菌中的表达
引用本文:曾怡,卢春,黄丽.人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白编码基因K8.1的分离、克隆及在大肠杆菌中的表达[J].南京医科大学学报,2004,24(2):105-108.
作者姓名:曾怡  卢春  黄丽
作者单位:南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏南京210029
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30100160,30271179)
摘    要:目的:分离、克隆人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1编码基因,并置于大肠杆菌中作融合表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点,以佛波酯(TPA)刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增出K8.1编码基因,克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,构建含K8.1基因重组质粒。重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β—D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果:分离、克隆的411bp序列与基因数据库中所登记的HHV-8 K8.1序列呈现100%同源性。IPTG诱导后的菌体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),显示有一个41ku的融合表达蛋白产生。结论:HHV-8K8.1编码基因在E.coli中初步获得正确表达。

关 键 词:人类疱疹病毒8型  包膜糖蛋白K8.1基因  原核表达
文章编号:1007-4368(2004)02-0105-04
修稿时间:2003年8月14日

Isolation and Cloning of Envelope Glycoprotein K8.1 Gene of Human Herpesvirus-8 and Its Expression in E.Coli
Abstract:
Keywords:human herpesvirus 8(HHV-8)  envelope glycoprotein K8  1 gene  prokaryotic expression
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