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K562细胞VEGF基因表达下调后的基因表达谱改变
引用本文:许文林,沈慧玲,吴朝阳,唐华容,王法春.K562细胞VEGF基因表达下调后的基因表达谱改变[J].中华医学遗传学杂志,2006,23(1):37-42.
作者姓名:许文林  沈慧玲  吴朝阳  唐华容  王法春
作者单位:1. 212002,镇江,江苏大学附属人民医院血液科
2. 212002,镇江,江苏大学附属人民医院中心实验室
摘    要:目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因VEGF表达下调对白血病K562细胞株基因表达谱的影响。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNA-RZ转染白血病细胞株K562、G418抗性筛选获得阳性克隆;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转入K562细胞;荧光定量PCR和免疫印迹反应检测白血病细胞中VEGF mRNA和蛋白表达量的改变;应用cDNA微阵列技术检测VEGF基因表达下调对白血病K562细胞株基因表达谱的影响。并用逆转录PCR验证PCNA、GSN基因的表达改变。结果抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNARZ转入白血病细胞株K562、G418筛选两周获得阳性克隆,PCR检测证实核酶基因整合入白血病细胞基因组DNA;与K562及K562/PC细胞(转染空质粒的K562细胞)相比,转染VEGF核酶基因的K562/RZ细胞VEGF mRNA和蛋白的表达量明显降低,芯片中共有表达差异的基因191条,包括周期相关基因、细胞凋亡相关基因、癌基因以及细胞信号和传递蛋白等基因,其中104条表达下调,87条表达上调。逆转录PCR证实GSN基因表达上调,PCNA基因表达下调。结论VEGF基因表达下调能引起白血病K562细胞株基因表达谱的改变,这些基因的改变可能对白血病细胞增殖、分化和凋亡等生物学行为产生了一定的影响。

关 键 词:K562细胞  血管内皮细胞生长因子  发夹状核酶基因  基因芯片
收稿时间:2005-07-19
修稿时间:2005年7月19日

The down-regulation of VEGF gene expression may link to change the expression profile of genes in leukemia cell line K562
XU Wen-lin,SHEN Hui-ling,WU Zhao-yang,TANG Hua-rong,WANG Fa-chun.The down-regulation of VEGF gene expression may link to change the expression profile of genes in leukemia cell line K562[J].Chinese Journal of Medical Genetics,2006,23(1):37-42.
Authors:XU Wen-lin  SHEN Hui-ling  WU Zhao-yang  TANG Hua-rong  WANG Fa-chun
Institution:Department of Hematology, The Affiliated People's Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang, Jiangsu 212002, P.R.China. XWL0806@163.com
Abstract:
Keywords:K562 cell  vascular endothelial growth factor  hairpin ribozyme gene  gene chip
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