LIM矿化蛋白-1对间充质干细胞成骨分化影响的实验研究

目的：构建LIM矿化蛋白-1（LIM mineralization protein-1，LMP-1）的真核表达质粒，并在兔骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）内表达，研究LMP-1对体外培养BMSCs成骨分化的影响。方法：RT-PCR克隆hLMP-1和骨形态发生蛋白－２（bone morphogenetic protein-2，BMP-2），并构建pIRES2-EGFP-LMP－1及pIRES2-EGFP-BMP－2重组质粒。分离培养BMSCs，脂质体介导下将pIRES2-EGFP-LMP－1、pIRES2-EGFP-BMP－2和pIRES2-EGFP质粒转染BMSCs。7 d后收集细胞，RT-PCR比较hLMP-1、hBMP-2及Ⅰ型胶原的表达，检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性，免疫组化染色比较骨钙素表达。结果：pIRES2-EGFP-LMP-1和pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒构建成功。重组质粒成功转染BMSCs，RT-PCR证实表达目的基因，hLMP-1和hBMP-2转染组可以明显促进细胞分泌ALP的活性，诱导Ⅰ型胶原和骨钙素的表达。结论：LMP-1可以促进BMSCs向成骨细胞分化。

Experimental study on effects of LIM mineralization protein-1 on the osteogenic potential of cultured bone marrow mesenchymal stem cells