| 水蛭ISSR-PCR反应体系的建立及优化 |
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| 引用本文： | 张香东,刘 庚,常素慧,白秀娟,杨洪雁,朱洪强. 水蛭ISSR-PCR反应体系的建立及优化[J]. 医学教育探索, 2013, 44(2): 215-218 |
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| 作者姓名： | 张香东 刘 庚 常素慧 白秀娟 杨洪雁 朱洪强 |
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| 作者单位： | 1.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118 2.东北农业大学动物科学与技术学院，黑龙江 哈尔滨 150030 |
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| 摘 要： | 目的 建立并优化水蛭ISSR-PCR反应体系及扩增程序，为水蛭进行遗传多样性研究提供依据。方法 使用引物ISSR825，采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA进行了体系优化，同时对引物的最佳退火温度进行了选择。结果 在25 μL总体积中，其中包括10×PCR 缓冲液 2.5 μL、Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 2.0 ng/μL，最佳退火温度为49.7 ℃。结论 所建立的最佳ISSR-PCR反应体系稳定可靠，可用于水蛭遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析。
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| 关 键 词： | 水蛭；ISSR-PCR体系；正交设计；体系优化；种质资源 |
Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system for Hirudo nipponica |
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| ZHANG Xiang-dong,LIU Geng,CHANG Su-hui,BAI Xiu-juan,YANG Hong-yan,ZHU Hong-qiang. Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system for Hirudo nipponica[J]. Researches in Medical Education, 2013, 44(2): 215-218 |
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| Authors: | ZHANG Xiang-dong LIU Geng CHANG Su-hui BAI Xiu-juan YANG Hong-yan ZHU Hong-qiang |
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| Affiliation: | 1.College of Chinese Medicinal Materials, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China 2.College of Animal Science and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hirudo nipponica Whitman ISSR-PCR system orthogonal design system optimization germplasm resources |
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