| 血红素加氧酶-1重组载体的构建及在胃癌细胞中的初步研究 |
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| 引用本文： | 王波,刘庆军,于景翠,尹玉静,魏旭冉,周虹.血红素加氧酶-1重组载体的构建及在胃癌细胞中的初步研究[J].医学分子生物学杂志,2010,7(4). |
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| 作者姓名： | 王波 刘庆军 于景翠 尹玉静 魏旭冉 周虹 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院野战输血研究所,北京市,100850
2. 哈尔滨医科大学第二临床医学院,哈尔滨市,150081 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(973计划) |
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| 摘 要： | 目的 构建人血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)及其突变体的真核表达载体,观察其在胃腺癌细胞中HO-1表达和活性变化,研究HO-1活性变化的胃腺癌细胞对顺铂抗药能力的变化,为进一步研究HO-1对肿瘤细胞影响机制奠定基础.方法 根据GenBank中HO-1 cDNA序列设计引物,调取基因并克隆人pcDNA3.1(+)质粒中,构建表达人野生型HO-1与突变型HO-1(HO-1G143H)的重组质粒.脂质体介导重组质粒转染胃腺癌细胞BGC823,用RT-PCR和Western印迹法分别检测细胞中HO-1 mRNA的表达和蛋白表达水平,体外测定HO-1活性变化,应用顺铂进行体外抗药性实验.结果 酶切鉴定和测序证实,HO-1真核表达载体构建成功;转染质粒后的BGC823,HO-1的mRNA和蛋白的表达水平明显上升;转入野生型质粒的细胞HO-1活性上升,转入突变型质粒的细胞HO-1活性下降;HO-1活性下降BGC823细胞抗顺铂杀伤能力增强.结论 构建了HO-1野生型与突变型真核表达载体;将其转入胃腺癌细胞,引起了HO-1的mRNA和蛋白表达的增加和活性变化;体外实验表明,HO-1活性下降的BGC823细胞抗顺铂能力增强.
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| 关 键 词： | 血红素加氧酶-1 肿瘤 基因重组 |
Constraction of Heme Oxygenase-1 Recombinant Plasmid and It's Research in Gastric Adenocarcinoma Cell |
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| WANG Bo,LIU Qingjun,YU Jingcui,YIN Yujing,WEI Xuran,ZHOU Hong.Constraction of Heme Oxygenase-1 Recombinant Plasmid and It's Research in Gastric Adenocarcinoma Cell[J].Journal of Medical Molecular Biology,2010,7(4). |
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| Authors: | WANG Bo LIU Qingjun YU Jingcui YIN Yujing WEI Xuran ZHOU Hong |
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