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| 肠三叶因子启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析 | |
| 作者单位： | ;1.徐州医学院附属淮海医院烧伤科;2.中国人民解放军第九七医院烧伤科 |
| 摘 要： | 目的:克隆肠三叶因子(ITF)启动子序列,构建ITF启动子荧光素酶报告基因载体,并检测启动子活性。方法:运用PCR方法从人全血基因组DNA中获得目的基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建不同长度的ITF启动子报告基因载体(-100--1 826bp);将重组质粒转染至HEK293细胞和LS174细胞48h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性。结果:PCR扩增出不同长度的ITF启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HEK293细胞和LS174细胞后检测启动子活性,100和200bp启动子活性较低,而300至1 826bp启动子活性较强。结论:成功构建了ITF启动子报告基因载体,具有活性的启动子最小长度为300bp。 |
| 关 键 词： | 肠三叶因子 荧光素酶报告基因 启动子 |
Construction and Analysis of Luciferase Reporter Vectors of ITF Gene Promoter |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |