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小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
引用本文:鲍俊峰,王胜军,马洁,崔大伟,杨先知,毛朝明,仝佳,邵启祥,许化溪. 小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 江苏大学学报(医学版), 2008, 18(4): 310
作者姓名:鲍俊峰  王胜军  马洁  崔大伟  杨先知  毛朝明  仝佳  邵启祥  许化溪
作者单位:江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏,镇江,212013;无锡市妇幼保健院,江苏,无锡,214001;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏,镇江,212013
基金项目:国家自然科学基金资助项目 , 江苏大学高级人才基金资助项目 , 江苏大学"拔尖人才工程"资助项目
摘    要:目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体。方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32 a,转化E.coliBL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,N i2 -NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性。结果:成功构建了Foxp3-pET-32 a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合。结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体。

关 键 词:Foxp3  原核表达  多克隆抗体  小鼠

Prokaryotic expression of mouse Foxp3 protein and preparation of polyclonal antibody
BAO Jun-feng,WANG Sheng-jun,MA Jie,CUI Da-wei,YANG Xian-zhi,MAO Chao-ming,TONG Jia,SHAO Qi-xiang,XU Hua-xi. Prokaryotic expression of mouse Foxp3 protein and preparation of polyclonal antibody[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2008, 18(4): 310
Authors:BAO Jun-feng  WANG Sheng-jun  MA Jie  CUI Da-wei  YANG Xian-zhi  MAO Chao-ming  TONG Jia  SHAO Qi-xiang  XU Hua-xi
Affiliation:BAO Jun-feng1,2,WANG Sheng-jun1,MA Jie1,CUI Da-wei1,YANG Xian-zhi1,MAO Chao-ming1,TONG Jia1,SHAO Qi-xiang1,XU Hua-xi1
Abstract:
Keywords:Foxp3  prokaryotic expression  polyclonal antibody  mouse
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