干扰HTERT降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线引起的DNA损伤反应

 目的 研究HTERT RNA干扰对人乳腺癌MCF-7细胞γ射线照射引起的DNA损伤反应的影响。方法 通过逆转录病毒为载体的HTERT-siRNA，抑制人乳腺癌MCF-7细胞中端粒酶催化亚单位HTERT表达，实时定量RT-PCR及Western blot确认HTERT表达水平、用137Cs放射源以3 Gy剂量γ射线照射细胞，于照射前以及照射后1、2、4、8和12h收集细胞，采用磷酸化53BP1 抗体进行免疫荧光染色，并于照射前、照射后1、4和12h收集细胞，Western blot检测53BP1蛋白磷酸化水平。结果 HTERT-siRNA处理的细胞HTERT表达水平比对照细胞降低3.20 (2-△△Ct)倍, HTERT蛋白水平降低2.56倍。HTERT-siRNA处理的细胞对γ射线引起的DNA损伤反应显著降低。结论 RNA干扰HTERT表达水平，可以降低人乳腺癌MCF-7细胞对γ射线照射引起的DNA损伤反应。