| 神经生长因子基因重组逆转录病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 何峻峰,龙大宏,李佳楣,冷水龙,谷海刚,宣爱国,潘学兵.神经生长因子基因重组逆转录病毒载体的构建与鉴定[J].解剖学研究,2006,28(4):254-257,F0004. |
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| 作者姓名： | 何峻峰 龙大宏 李佳楣 冷水龙 谷海刚 宣爱国 潘学兵 |
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| 作者单位： | 广州医学院人体解剖学教研室,广东,广州,510182 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(No.04009566)，广东省医学科研基金(No.A2003276)，广州市科技计划项目(No.041011) |
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| 摘 要： | 目的构建神经生长因子(NGF)基因重组逆转录病毒表达载体,研究NGF在神经干细胞(NSC)中的表达情况。方法从大鼠海马组织提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得编码大鼠β-NGF的基因片段,应用基因重组技术,将大鼠β-NGF基因片段克隆到逆转录病毒表达载体pLEGFP-N1中,通过脂质体Lipofectamine2000转染包装细胞PT67,经G418筛选后,收集阳性克隆病毒上清,用于感染神经干细胞(NSC),观察该NSC表达的NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果限制性内切酶酶切分析鉴定表明为正确重组子,β-NGF基因在NSC中获得表达,该NSC的培养上清液可以促进PC12细胞突起生长。结论重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-NGF构建成功,β-NGF基因可在NSC中表达并具有生物学活性。
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| 关 键 词： | 神经生长因子 逆转录病毒载体 神经干细胞 基因重组 阿尔茨海默病 |
| 收稿时间： | 2006-05-25 |
| 修稿时间： | 2006-05-25 |
Construction and identification of recombinant retroviral vector carrying NGF gene |
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| HE Jun-feng,LONG Da-hong,LI Jia-mei,LENG Shui-long,GU Hai-gang,XUAN Ai-guo,PAN Xue-bing.Construction and identification of recombinant retroviral vector carrying NGF gene[J].Anatomy Research,2006,28(4):254-257,F0004. |
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| Authors: | HE Jun-feng LONG Da-hong LI Jia-mei LENG Shui-long GU Hai-gang XUAN Ai-guo PAN Xue-bing |
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| Institution: | Department of Anatomy, Guangzhou Medical College,Guangzhou 510182 China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Neurotrophic factor Retroviral vector Neural stem cell Gene recombination Alzheimer's disease |
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