原代人脂肪基质细胞体内成骨能力的检测

目的：检测原代人脂肪基质细胞（human adipose-derived stromal sells，hASCs）的体内成骨能力，为应用其构建组织工程化骨奠定基础。方法：酶消化法分离原代hASCs，细胞经成骨向和成脂肪向诱导后，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色和茜素红矿化染色检测其成骨向分化的能力，油红O染色检测其成脂肪向分化的能力。体内实验使用12只裸鼠，于其背部一侧皮下植入原代hASCs + 支架材料作为实验组，同一裸鼠的另一侧植入单纯支架材料作为对照组。植入4周和8周后取材，制成组织切片，进行HE染色和免疫组织化学染色观察。结果：300 mL脂肪组织中可以获得约6×10⁷个原代hASCs。体外实验证实原代hASCs具有成骨向和成脂肪向分化的潜能。HE染色可见，植入4周和8周后植入物中有类骨组织形成，免疫组织化学染色显示骨钙素、ALP和抗人核抗体呈阳性表达。结论：原代人脂肪基质细胞与支架材料构建的复合物可以在裸鼠体内成骨。