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Ad5-增强型绿色荧光蛋白和rAAV2-增强型绿色荧光蛋白转染脂肪间充质干细胞的对比*
引用本文:袁小洪,安荣泽,王兆杰,贾婀娜,齐新文,陈金平,杨晋,刘凡凡. Ad5-增强型绿色荧光蛋白和rAAV2-增强型绿色荧光蛋白转染脂肪间充质干细胞的对比*[J]. 中国神经再生研究, 2010, 14(14): 2588-2590
作者姓名:袁小洪  安荣泽  王兆杰  贾婀娜  齐新文  陈金平  杨晋  刘凡凡
作者单位:遵义医学院第五附属(珠海)医院,遵义医学院第五附属医院,遵义医学院第五附属医院骨科,遵义医学院珠海校区研究生与科研部,遵义医学院第五附属(珠海)医院,遵义医学院第五附属(珠海)医院,遵义医学院珠海校区研究生与科研部,遵义医学院珠海校区研究生与科研部
基金项目:课题名称为“组织工程软骨”,是贵州省省长基金资助课题。
摘    要:背景:利用基因转染技术诱导脂肪间充质干细胞成软骨细胞已有报道,但腺病毒和腺相关病毒转染脂肪间充质干细胞各有不同,且腺相关病毒载体能否转染脂肪间充质干细胞众说不一。目的:观察Ad5-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和rAAV2-EGFP转染脂肪间充质干细胞后增强型绿色荧光蛋白的表达及转染后细胞增殖能力的变化。方法:脂肪组织来源于6月龄新西兰大白兔颈背部。机械消化和酶消化法分离提取脂肪间充质干细胞,体外培养扩增。分别采用腺病毒载体(Ad5-EGFP)和腺相关病毒载体(rAAV2-EGFP)转染脂肪间充质干细胞,并观察EGFP的表达。rAAV2-EGFP转染后,需加入2 μL丁酸钠(1 mol/L)。采用MTT法检测基因转染对脂肪间充质干细胞增殖能力的影响。结果与结论:体外培养的脂肪间充质干细胞呈扁平状和长梭形,细胞形态均一,传代稳定。Ad5-EGFP组和rAAV2-EGFP组均能观察到较多荧光细胞,转染效率分别达到88%和83%。腺病毒和腺相关病毒载体均能转染脂肪间充质干细胞,且转染效率很高。腺相关病毒需要借助丁酸钠来提高其基因表达水平。

关 键 词:腺病毒;腺相关病毒;脂肪间充质干细胞;增强型绿色荧光蛋白;转染

Comparative study of Ad5-EGFP and rAAV2-EGFP transfecting Adipose-derived mesenchymal stem cells
Affiliation:Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China,Fifth Affiliated (Zhuhai) Hospital, Zunyi Medical College, (Zhuhai) 519100, Guangdong Province, China
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