| PCR诱导猴免疫缺陷病毒SF2、SF3位点突变和转染研究 |
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| 引用本文： | 刘晓民,张秋滨,潘尚哈.PCR诱导猴免疫缺陷病毒SF2、SF3位点突变和转染研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,1999,19(4):323-325. |
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| 作者姓名： | 刘晓民 张秋滨 潘尚哈 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学第一医院分子生物室，黑龙江省医学会，美国马里兰大学免疫微生物系 |
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| 基金项目： | 国家教委留学归国人员基金 |
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| 摘 要： | 目的研究猴免疫缺陷病毒（ｓｉｍｉａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ，ＳＩＶ）ＬＴＲ区ＳＦ２或ＳＦ３位点结构与病毒转录活性的关系。方法利用ＬＴＲ５端引物和含ＳＦ２或ＳＦ３部位双点突变的中间引物，首次用ＰＣＲ扩增长度约０．６ｋｂ的ＳＩＶｍａｃ２３９ＬＴＲ５端ＤＮＡ片段，经纯化后，作为正向引物，再次用ＰＣＲ扩增长度约１．１ｋｂ的ＬＴＲ全段（９２０９～１０２７９）并将其连接到ＰＢＳ－ＳＩＶｍａｃ２３９３端病毒的重组质粒上，后者再经ＳｐｈⅠ切点与ＳＩＶｍａｃ２３９５端病毒连接。用突变的病毒转染外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），用ＥＬＩＳＡ法动态测定培养液中ＳＩＶ核心蛋白Ｐ２７浓度。结果与ＳＩＶｍａｃ２３９株相比，ＳＦ２或ＳＦ３突变株在转染后，其核心蛋白Ｐ２７水平无明显降低。结论两步ＰＣＲ诱导突变是一种简单有效的方法；ＳＦ２或ＳＦ３位点结构对于ＳＩＶｍａｃ２３９在外周血淋巴细胞中的转录活性可能不具重要的影响
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| 关 键 词： | 猴免疫缺陷病毒 聚合酶链反应 突变 转染 |
PCR based mutagenesis on SF2 or SF3 site and transfection study with SIV mutants |
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| LIU Xiaomin ,ZHANG Qiubin,PAN Shangha,et al..PCR based mutagenesis on SF2 or SF3 site and transfection study with SIV mutants[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,1999,19(4):323-325. |
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| Authors: | LIU Xiaomin ZHANG Qiubin PAN Shangha |
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| Institution: | LIU Xiaomin *,ZHANG Qiubin,PAN Shangha,et al. * Laboratory of Molecular Biology,First Hospital,Harbin Medical University,Harbin 150001 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Simian immunodeficiency virus PCR Mutation Transfection |
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